進樣量以及最佳流速受色譜柱尺寸限制。理想情況下，如果樣品與流動相使用相同的溶劑，進樣量范圍如下：

最佳進樣量與色譜柱的柱體積相關(guān)，因此取決于色譜柱的橫截面積（A = π r²）和長度（L）。您可以根據(jù)現(xiàn)有方法的進樣量估算調(diào)整后的進樣量。如果要轉(zhuǎn)換為不同內(nèi)徑（ID）的色譜柱（包裝材料和長度保持不變），只需將當(dāng)前進樣量乘以新舊色譜柱的半徑平方之比即可確定新方法的正確進樣量。

會發(fā)生溶劑效應(yīng)，通常會導(dǎo)致峰變形、靈敏度差和保留時間縮短等問題。例如毒物分析中的PFAS 分析中的 PFBA 會容易受溶劑效應(yīng)影響，因此我們建議使用與初始流動相相近的溶劑來避免溶劑效應(yīng)。如果不便于這樣做，請在確保溶劑與流動相可以混溶的前提下盡量減小進樣體積來消弱溶劑效應(yīng)。

術(shù)語“色譜柱體積"通常是指空隙體積，它代表二氧化硅顆粒之間的流動相體積。空隙體積可以通過總柱體積（ π r² L）乘以對應(yīng)色譜柱的裝填系數(shù)來獲得。對于全多孔色譜柱，計算空隙體積（mL）的公式為 V = 0.68 π r² L，其中 V = 柱體積，單位為 mL；r = 柱截面半徑，單位為厘米；L = 柱長，單位為厘米。對于表面多孔的色譜柱，例如我們的 Raptor 色譜柱，系數(shù)不同，空隙體積（mL）的公式為 V = 0.50π r²L 。

當(dāng)通過 HPLC 分析金屬敏感化合物時，流路中最大的金屬面積是液相色譜柱的柱管。對柱管內(nèi)壁進行惰性化處理的 Inert 色譜柱，可以消除金屬敏感化合物與金屬之間的非特異性吸附。從而為這類化合物提供更好的峰形和響應(yīng)。

如果您使用的液相儀器不是惰性 HPLC 系統(tǒng)，有可能需要對 HPLC 管路進行鈍化，因為從進樣器到色譜柱之間流路中的金屬可能會對某些金屬敏感化合物產(chǎn)生一定影響。具體鈍化方法，歡迎您聯(lián)系我們獲取針對性的幫助。