Gibco血清是細胞培養中重要的元素之一,今天我們為大家整理了一些血清使用在實驗室里常會遇到的問題供參考:
1.血清保存的好方法是什么?
建議血清應保存在-5至-2O℃環境下。然而若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。
2.血清的解凍技巧是什么?
建議將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意融解過程中必須規則地搖晃均勻。血清解凍后若發現有絮狀沉淀物有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。
3.為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
因此建議大家若非必須,可不需要做熱處理這一步。如此一來不但節省您寶貴的時間,更確保血清的質量。