進行蛋白質印跡實驗時,必須優化一抗和二抗的量以減少背景并確保獲得足夠的信號。我們的促旋酶多克隆抗體和單克隆抗體已經過測試,可以減少進一步優化的需要。*
如果已加入純蛋白,則應將一抗稀釋 1:1,000;如果加入細胞裂解物,則應將一抗稀釋 1:200。稀釋液通常在洗滌緩沖液(1X TBS、0.1% Tween 20、1% 脫脂奶粉)中進行,每片印跡 20 ml,孵育 1 小時。用洗滌緩沖液洗滌以去除一抗后,將二抗以 1:5,000 的稀釋度加入洗滌緩沖液中(多克隆抗體為抗兔抗體,單克隆抗體為抗鼠抗體)。
然后可以使用標準比色法或化學發光法對印跡進行可視化。
* 優化條件適用于 SDS-PAGE 微型凝膠,其中每條泳道中裝有 1 µg 蛋白質樣品(純化蛋白質或細胞提取物),凝膠在印跡前在標準 SDS-PAGE 條件下運行(43 kDa 蛋白質 200 mA 運行 45 分鐘或 90 kDa 或 97 kDa 蛋白質 200 mA 運行 60 分鐘)。
北京和一生物科技有限公司專業代理inspiralis全系列產品,專營進口生物試劑,科學儀器,實驗消耗品,化工原料及藥物中間體等。公司與諸多國外品牌簽下代理,sigma、santa、RD、Abcam、CST、toxin、streck、Biolegend、ebioscience、saracare、polyplus、Beyotime、Novus、moltox等,能為廣大科研用戶提供數萬種試劑、儀器和實驗消耗品。
我們公司的優勢:
1:與500多家公司合作,基本什么品牌都能進口,包括血清,抗體,耗材,還有部分限制進口的
2:部分產品現貨,物流穩定
3:一手貨源,價格價格優,售后齊全,歡迎新老客戶咨詢訂購